云达不莱梅对拜仁慕尼黑
  

非乙酰化cAMP/cGMP ELISA試劑盒;G蛋白激活檢測抗體;點突變系列抗體火爆熱銷及隆重招商!!!

電 話:027-87561033 15071267082
傳 真:027-87561022
郵 編:430074
公司地址:武漢市東湖開發區光谷生物城創新基地B3-3棟2-3樓

客戶論文
您現在的位置:首頁 >> 客戶論文 >>
SUMOylation of the GTPase Rac1 is required for optimal cell migration ,Nature Cell Biology, 2010

SUMOylation of the GTPase Rac1 is required for optimal cell migration

 

Sonia Castillo-Lluva1, Michael H. Tatham2, Richard C. Jones3,4, Ellis G. Jaffray2, Ricky D. 

Edmondson3,5, Ronald T. Hayand Angeliki Malliri1,6 

 

 

The Rho-like GTPase, Rac1, induces cytoskeletal rearrangements required

 for cell migration. Rac activation is regulated through a

 number of mechanisms, including control of nucleotide exchange

 and hydrolysis, regulation of subcellular localization or 

modulation of protein-expression levels13. Here, we demonstrate that (the small ubiquitin-like modifier) SUMO E3-ligase, PIAS3, interacts with Rac1 and is required for 

increased Rac activation and optimal cell migration in 

response to hepatocyte growth factor (HGF) signalling. 

Rac1 can be conjugated to SUMO-1 in response to hepatocyte growth factor treatment and 

SUMOylation is enhanced by PIAS3. Furthermore, we identify non-consensus sites within the polybasic region of Rac1 as the 

main location for SUMO conjugation. PIAS3-mediated SUMOylation of Rac1 controls the levels of Rac1GTP and the ability of Rac1 to stimulate lamellipodia, cell 

migration and invasion. The finding that a Ras superfamily 

member can be SUMOylated provides insights into the regulation 

of these critical mediators of cell behaviour. Our data reveal 

a role for SUMO in the regulation of cell migration and 

invasion. To identify proteins that regulate Rac1 during cell migration, we per-formed tandem affinity purification (TAP) of native protein complexes containing TAPtagged Rac1 from MDCKII (Madin-Darby canine kid-ney strain II) cells following HGF treatment (a ligand for the growth fac-tor receptor c-Met, and a migration stimulus). The assay was performed at a time that Rac1 is activated 

and cells begin to migrate(Supplementary Information, Fig. S1ac). Following TAP, protein complexes were ana-lysed by mass spectrometry (Supplementary Information, Fig. S1d and Table S1). Amongst

 known and putative Rac1 interactors, we identified PIAS3 (protein inhibitor of activated

 STAT3) as a Rac1-binding protein detected only in HGF-treated samples. PIAS3 interacts with Rac1 in vitro and in vivo (Fig. 1a, b and Supplementary 

Information, Fig. S1e, f) and this interaction was more efficient when Rac1 was in its activated

 form 

 

(Fig. 1c and Supplementary Information, Fig. S1g). Additionally, acti-vation of HGF signalling using an oncogenic form of the Met receptor (Tpr-Met)5,6 increased this interaction (Fig. 1d). Next, we examined if PIAS3 was necessary for cell 

migration in response to HGF. We generated stable MDCKII cell lines carrying doxycycline-inducible short hairpin interfering RNAs (shRNAs) to pias3 (two independent targets 

were used, labelled #1 and #2) or control scrambled-sequence shRNA (Supplementary Information, Fig. S1h). Downregulation of PIAS3 resulted in 

cells migrating slower than con-trols (Fig. 1e) and impaired lamellipodia-membrane ruffle formation (Supplementary Information, Fig. S1i). From the reduced 

migration and lamellipodia formation, we hypothesized that PIAS3 might be influenc-ing RacGTP levels. Significantly, although RacGTP levels increased in control cells following HGF treatment, no increase was observed in 

PIAS3-downregulated cells, despite normal activation of the ERK MAPK pathway, indicating a 

specific requirement of PIAS3 for Rac activation (Fig. 1f). Consistent with this defect in

 Rac activation, phosphorylation (and hence activation) of p38, a known downstream mediator

 of Rac signalling7, was impaired in PIAS3-downregulated cells (Supplementary Information, Fig. S1j). HGF stimulates the motility of 

epithelial cells by initially inducing the spread of cell colonies through lamellipodia-mem-brane ruffle formation, followed by disruption of cellcell junctions and subsequent cell scattering; Rac1 is involved in both processes8. PIAS3 was 

required not only for optimal initial Rac activation following HGF treat-ment, but also for optimal Rac activation at later times (Fig. 1g). This con-tinuous involvement of PIAS3 in Rac activation could explain the defect in migration observed

 throughout the 24 h of HGF treatment. RacGTP levels were elevated in cells overexpressing PIAS3 and also treated with HGF, compared

 with control cells (Fig. 1h, i), confirming a function for PIAS3 in augmenting RacGTP levels following HGF treatment. In addition to HGF, the modest activation of Rac by

 epidermal growth fac-tor (EGF), or serum, was also impaired in PIAS3-downregulated cells (Supplementary Information, Fig. S1k and data not shown). This indi-cates that the requirement of PIAS3 for optimal Rac activation is not ......

 

具體客戶論文請點擊 http://www.nature.com/ncb/journal/v12/n11/full/ncb2112.html

在線客服
電 話:027-87561033 15071267082 傳 真:027-87561022 Q Q :929192314 郵 編:430064 郵 箱:[email protected] 公司地址:武漢市東湖開發區光谷生物城B3-3棟2-3樓
鄂公網安備 42018502003460號
云达不莱梅对拜仁慕尼黑 天津11选5走势图查号 av女优大槻响自爆爱处男 广东11选5怎么玩稳赚 高尔夫球简笔画 赛车6码8期倍投方案 日本一本道迅雷下载 凤凰时时彩平台官网 甘肃十一选五app 广西11选五走势图 dps魅惑魔女 pk10彩票平台网站 辽宁十一选五定胆技巧 手工活在家赚钱 斗地主棋牌游戏赚钱 剑三满级如何赚钱